赵志勇1, 朱少华2, 赵晓燕1, 索玉娟1, 陈爱亮3, 李晓贝1, 张艳梅1, 周昌艳1*
2021,37(4): 117-124.
为建立一种检测肉制品中6种动物源性成分(牛、羊、鸡、猪、鸭和驴等)的多重PCR方法,比较了3种DNA提取方法,设计筛选了6对引物并对其特异性进行验证,同时对影响多重PCR扩增效率的因素(引物比例、退火温度和镁离子浓度等)进行优化。结果表明:试剂盒法为最佳的DNA提取方法;多重PCR法最优反应条件如下:引物比例为牛/羊/鸡/鸭/猪/驴=2/1/1/0.5/1/1,退火温度为58.6 ℃,镁离子浓度为3 mmol/L,各动物源性成分DNA最低检出限为0.1 ng。该方法具有检测特异性强、灵敏度高、简单快捷等优点,可用于肉制品中六种动物源性成分的同时检测。