钮莹芳1,2,3,吴彩凤2,3*,张树山2,3,陈亚宁1,2,3,戴建军2,3,张德福2,3*
2017,33(3): 124-129.
在猪MII期猪卵母细胞冷冻解冻后的孵育液中添加凋亡抑制剂Z-VAD-FMK,通过检测线粒体膜电位、早期凋亡、胚胎发育和相关基因表达等研究Z-VAD-FMK对冷冻后卵母细胞的影响。结果表明:(1)冷冻后线粒体膜电位(0.91)与新鲜卵母细胞(1.33)相比显著降低,Z-VAD-FMK添加显著提高线粒体膜电位(1.19);(2)冷冻后卵母细胞的早期凋亡率(57.65%)与新鲜卵母细胞(8.37)相比显著升高,存活率(61.45%)、孤雌激活卵裂率(13.18%)和囊胚率(3.10%)与新鲜卵母细胞(98.97%,89.41%和41.40%)相比显著下降,冻后孵育液中Z-VAD-FMK处理能显著降低其早期凋亡比率(32.82%),并显著提高其存活、孤雌激活卵裂和囊胚的发育能力(73.21%,39.83和10.79%);(3)冷冻后死亡受体途径和线粒体途径中促凋亡基因表达显著增加,抗凋亡基因表达显著降低,加入Z-VAD-FMK后促凋亡基因表达显著下降,抗凋亡基因表达显著增加。总之,凋亡抑制剂Z-VAD-FMK在冻后孵育液中添加后能提高卵母细胞膜电位水平,降低细胞凋亡和相关基因表达,从而达到提高冻后猪卵母细胞体外发育能力的目的。